如何分离土壤中真菌放线菌
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土壤里的细菌习性差别很大，生条件要求也很不一样，有固氮菌，硅酸盐细菌，菌根菌，很多很多种，有很多种是很难在一般培养基中生的，需要有特殊的环境，但也有很多种可以在普通的培养基上培养，生比较快，可以培养出五彩斑斓的菌落。
对好氧菌培养相对容易一些，如果要培养厌氧菌条件特殊，需要加入特殊的品，或者采取深层培养或其他的厌氧条件。
土壤中微生物特别丰富，含有放线菌、真菌等，在培养过程中，可以使用选择性培养基，加入一些抑其生的品，尽可能消除其干扰。
这是一种应用十分广泛的天然培养基，其中的牛肉膏为微生物提供碳源、磷酸盐和维生素，蛋白胨主要提供氮源和维生素，而NaCl提供无机盐
牛肉膏0.3g
蛋白胨1g
氯化钠0.5g
琼脂2g
自来水100mL
pH7.0～7.2
灭菌1.05kg/cm2，22min
配具体步骤
1．称量
按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。 牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。 也可放在称量纸上，称量后直接放入水中，这时如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片。 蛋白胨很易吸潮，在称取时动作要迅速。 另外，称品时严防品混杂，一把牛角匙用于一种品，或称取一种品后，洗净、擦干，再称取另一品，瓶盖也不要盖错。
2．溶化
在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解。 待品完全溶解后，补充水分到所需的总体积。 如果配固体培养基，将称好的琼脂放入已溶化的品中，再加热溶化，在琼脂溶化的过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底使烧杯破裂。 最后补足所失的水分。
3．调pH
在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值，如果pH偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/LNaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其pH值，直至pH达7．6。 反之，则用1mol/LHCl进行调节。 注意pH值不要调过，以避免回调，否则，将会影响培养基内各离子的浓度。
对于有些要求pH值较精确的微生物，其pH的调节可用酸度计进行（使用方法，可参考有关说明书）。
4．过滤
趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利结果的观察。 一般无特殊要求的情况下，这一步可以去（本实验无需过滤）。
5．分装
按实验要求，可将配的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。 分装装置见图Ⅴ-1。
分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。
(1)液体分装分装高度以试管高度的1/4左右为宜。
(2)固体分装分装试管，其装量不超过管高的1/5，灭菌后成斜面，如图Ⅴ-2。 分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
(3)半固体分装试管一般以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。
6．加塞
培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞，以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染，并保证有良好的通气性能（棉塞作方法附本实验后面）。
7．包扎
加塞后，将全部试管用麻绳捆扎好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道麻绳扎好。 用记号笔注明培养基名称、组别、日期。 三角烧瓶加塞后，外包牛皮纸，用麻绳以活结形式扎好，使用时容易解开，同样用记号笔注明培养基名称、组别、日期。
8．灭菌
将上述培养基以1．05kg/cm2（15磅/英寸2），121．3℃，20分钟高压蒸汽灭菌。 如因特殊情况不能及时灭菌，则应放入冰箱内暂存。
9．搁置斜面
将灭菌的试管培养基冷至50℃左右，将试管棉塞端搁在玻棒上，搁置的斜面度以不超过试管总的一半为宜。
10．无菌检查
将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时，以检查灭菌是否彻底。
采集一般定点于耕作层0--20cm，先除去表土1--
2cm，以无菌铲采土充分混匀后用无菌塑料袋分装。
2.培养基的备与平板作
牛肉膏蛋白胨、高氏1号和马铃薯蔗糖琼脂固体培
养基培养基的溶解与平板作
3、平板的作
每组准备三套无菌培养皿，在皿底注明稀释液浓度。
融化锥形瓶中的培养基，放在45-50℃恒温水浴锅中备用
倒入45-50℃融化的培养基约1/4-1/3培养皿高度。 培养皿平放在桌上顺时、逆时轻轻转动，混匀皿中物质。 培养基冷凝后即成平板。
4、备稀释液（无菌作）
(1)备土壤悬液：
称取土样10g，迅速倒入90mL无菌水三角瓶中，振荡5~10min，使土样充分散，即成为10-1的土壤悬液。
(2)稀释：
用1mL无菌移液器吸取10-1的土壤悬液1.0mL，放入9.0mL无菌水中即为10-2稀释液，如此重复，可依次成10-2~10-8的稀释液。 注意：作时每一个稀释度换用一个移液管，以减少稀释中的误差。
5.培养
将接种好的细菌、放线菌、霉菌平板倒置，即皿盖朝下放置，于28~30℃中恒温培养，细菌
培养1~2d，放线菌培养5~7d，霉菌培养3~5d。 观察生的菌落并计数。
- 急，请问如何从土壤中分离出细菌、放线菌、霉菌、酵母菌、真菌
- 土壤微生物分离培养用什么培养基
- 测定土壤中真菌细菌放线菌数量，怎么测定
- 跪求土壤微生物的测定：涂布平板法测定细菌、真菌和放线菌的实验步骤（详细）
急，请问如何从土壤中分离出细菌、放线菌、霉菌、酵母菌、真菌
首先用灭菌水稀释土壤，充分摇匀，就可以用玻棒蘸取土壤溶液，在经过灭菌的特培养基培养皿上划线，然后进行培养。 一般我们培养细菌和酵母菌用LB培养基，青霉菌用PDA培养基，其他的没坐过不太清楚。 等培养出来后挑出单一菌落进行继代培养，用显微镜观察是什么菌。土壤里的细菌习性差别很大，生条件要求也很不一样，有固氮菌，硅酸盐细菌，菌根菌，很多很多种，有很多种是很难在一般培养基中生的，需要有特殊的环境，但也有很多种可以在普通的培养基上培养，生比较快，可以培养出五彩斑斓的菌落。
对好氧菌培养相对容易一些，如果要培养厌氧菌条件特殊，需要加入特殊的品，或者采取深层培养或其他的厌氧条件。
土壤中微生物特别丰富，含有放线菌、真菌等，在培养过程中，可以使用选择性培养基，加入一些抑其生的品，尽可能消除其干扰。
土壤微生物分离培养用什么培养基
1、牛肉膏蛋白胨培养基。 （分离出各种细菌、放线菌。 ）这是一种应用十分广泛的天然培养基，其中的牛肉膏为微生物提供碳源、磷酸盐和维生素，蛋白胨主要提供氮源和维生素，而NaCl提供无机盐
牛肉膏0.3g
蛋白胨1g
氯化钠0.5g
琼脂2g
自来水100mL
pH7.0～7.2
灭菌1.05kg/cm2，22min
配具体步骤
1．称量
按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入烧杯中。 牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。 也可放在称量纸上，称量后直接放入水中，这时如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片。 蛋白胨很易吸潮，在称取时动作要迅速。 另外，称品时严防品混杂，一把牛角匙用于一种品，或称取一种品后，洗净、擦干，再称取另一品，瓶盖也不要盖错。
2．溶化
在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解。 待品完全溶解后，补充水分到所需的总体积。 如果配固体培养基，将称好的琼脂放入已溶化的品中，再加热溶化，在琼脂溶化的过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底使烧杯破裂。 最后补足所失的水分。
3．调pH
在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值，如果pH偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/LNaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其pH值，直至pH达7．6。 反之，则用1mol/LHCl进行调节。 注意pH值不要调过，以避免回调，否则，将会影响培养基内各离子的浓度。
对于有些要求pH值较精确的微生物，其pH的调节可用酸度计进行（使用方法，可参考有关说明书）。
4．过滤
趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利结果的观察。 一般无特殊要求的情况下，这一步可以去（本实验无需过滤）。
5．分装
按实验要求，可将配的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。 分装装置见图Ⅴ-1。
分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。
(1)液体分装分装高度以试管高度的1/4左右为宜。
(2)固体分装分装试管，其装量不超过管高的1/5，灭菌后成斜面，如图Ⅴ-2。 分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
(3)半固体分装试管一般以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。
6．加塞
培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞，以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染，并保证有良好的通气性能（棉塞作方法附本实验后面）。
7．包扎
加塞后，将全部试管用麻绳捆扎好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道麻绳扎好。 用记号笔注明培养基名称、组别、日期。 三角烧瓶加塞后，外包牛皮纸，用麻绳以活结形式扎好，使用时容易解开，同样用记号笔注明培养基名称、组别、日期。
8．灭菌
将上述培养基以1．05kg/cm2（15磅/英寸2），121．3℃，20分钟高压蒸汽灭菌。 如因特殊情况不能及时灭菌，则应放入冰箱内暂存。
9．搁置斜面
将灭菌的试管培养基冷至50℃左右，将试管棉塞端搁在玻棒上，搁置的斜面度以不超过试管总的一半为宜。
10．无菌检查
将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时，以检查灭菌是否彻底。
测定土壤中真菌细菌放线菌数量，怎么测定
放线菌使用高氏一号培养基进行分离，真菌使用虎红培养基进行分离，细菌可以用pda培养基进行分离。跪求土壤微生物的测定：涂布平板法测定细菌、真菌和放线菌的实验步骤（详细）
1.土壤样品采集采集一般定点于耕作层0--20cm，先除去表土1--
2cm，以无菌铲采土充分混匀后用无菌塑料袋分装。
2.培养基的备与平板作
牛肉膏蛋白胨、高氏1号和马铃薯蔗糖琼脂固体培
养基培养基的溶解与平板作
3、平板的作
每组准备三套无菌培养皿，在皿底注明稀释液浓度。
融化锥形瓶中的培养基，放在45-50℃恒温水浴锅中备用
倒入45-50℃融化的培养基约1/4-1/3培养皿高度。 培养皿平放在桌上顺时、逆时轻轻转动，混匀皿中物质。 培养基冷凝后即成平板。
4、备稀释液（无菌作）
(1)备土壤悬液：
称取土样10g，迅速倒入90mL无菌水三角瓶中，振荡5~10min，使土样充分散，即成为10-1的土壤悬液。
(2)稀释：
用1mL无菌移液器吸取10-1的土壤悬液1.0mL，放入9.0mL无菌水中即为10-2稀释液，如此重复，可依次成10-2~10-8的稀释液。 注意：作时每一个稀释度换用一个移液管，以减少稀释中的误差。
5.培养
将接种好的细菌、放线菌、霉菌平板倒置，即皿盖朝下放置，于28~30℃中恒温培养，细菌
培养1~2d，放线菌培养5~7d，霉菌培养3~5d。 观察生的菌落并计数。